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當前位置:上海恒遠生物技術發(fā)展有限公司 > 產品中心 > ELISA試劑盒 > 人ELISA試劑盒 > IL-27,人白細胞介素27ELISA試劑盒技術指導
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價格:電議
采購度:155 原產地:美洲
發(fā)布時間:2017/11/8 16:00:50
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中人白細胞介素27(IL-27)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人白細胞介素27(IL-27)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白細胞介素27(IL-27)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
1.專一性強?乖c抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應,顯示抗原與抗體的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。
4.結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質,應用酶免吸附技術進行比色測定,依據光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測,免疫酶技術都能在較短時間內完成。
7.和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實驗室及生產應用單位均易購置儀器
6、價格優(yōu)惠,質量保證,限度的節(jié)省實驗經費。
1. 試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。 實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,個孔與*后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。
3. 孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜,以避免液體蒸發(fā);洗板后應盡快進行下步操作,任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。
4. 洗滌:洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響*后的酶標儀讀數(shù)。
小編簡單整理了5個問題,具體內容如下:
1、一個elisa試劑盒檢測幾個樣品?
小編自己在各大論壇看到*多的三個答案:
1)48T 可做42個樣本加6個標準曲線;96T 可做90個樣本加6個標準曲線
2)以96T試劑盒來算,定量的試劑盒一般可以做90個左右的樣品,定性的試劑盒可以做94個左右的樣品
3)96T的ELISA試劑盒,去除標準品復孔檢測,*多還能檢測80個標本;48T的*多30個樣本。
2、elisa試劑盒96T的能做檢測多少血清樣品?板能重復利用嗎?
96T,一般做復孔的話,做標準曲線需要16個孔,剩下80個孔就可以做40個樣本。這個板不能重復利用。而且配套的試劑也只是夠一塊板子用的。
3、想請教一下,我想用elisa法測血清里的一種抗原,查了資料,發(fā)現(xiàn)沒有現(xiàn)成的試劑盒用,現(xiàn)在就有2種備選方案,一種是買抗體對自己包被(查了R&D等大公司都沒有可用于elisa的單抗)。哪種比較好呢?自己包被的會不會比國產的試劑盒可靠呢?
如果你覺得技術不錯有隊其他公司不放心,可以自己購買抗體對自己包被,這個就是麻煩點,自己包被用著放心,舒心;
4、western 和ELISA 處理樣本有何差別?
Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液(含有蛋白酶抑制劑),然后冰上研磨,收集于EP管,冰上裂解30min,4度12000rpm離心15min,取上清分裝,即得到蛋白樣品。建議直接電泳,多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量,一次性用完一支,避免反復凍融。
ELISA樣品,直接腦組織冰上勻漿,收集于EP管,同上一樣離心,大約220-250ul每支分裝(因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul,做復孔,每個樣品2孔,就需要200ul,為了避免不夠2孔,分裝時要大于200ul每支),直接實驗。多余的-80保存,一樣避免反復凍融。
不過ELISA少量樣品進行預實驗,或者查閱文獻,看看大概組織里有多高濃度,選擇合適的試劑盒,測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準,或者濃度過低,小于試劑盒可測濃度。
5、Elisa試劑盒該買哪家公司的呢?
提出這個問題的朋友其實該打,目前上各個品牌的試劑盒生廠商,都會有其偏重點,像BIM、R&D等品牌在細胞因子方面的試劑盒就非常好,而其他牌子也一樣的。
Bender:粘附分子方面的試劑盒;
Cayman:花生四烯酸類產品的試劑盒;
Merck(Linco):內分泌研究方面的試劑盒;
更新時間:2024/11/18 9:49:11
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